純化水微生物限度檢測可以用直接接種方法嗎,怎么操作?純化水微生物限度檢測可以使用直接接種方法,可參考以下操作步驟:
樣品準(zhǔn)備:
確保所使用的容器、取樣的吸管、鑷子等用品均已滅菌。取水點(diǎn)應(yīng)先打開讓水流動(dòng)一段時(shí)間,然后快速取適量水樣到容器中,并將其帶入微生物限度實(shí)驗(yàn)室。
樣品稀釋(非必需步驟,根據(jù)實(shí)際情況選擇):如果純化水的微生物含量可能較高,需要進(jìn)行稀釋以保證菌落計(jì)數(shù)在可觀察的范圍內(nèi)。通常制備 10?1、10?2、10?3 等不同稀釋梯度的樣品9。例如,取 10ml 純化水加入到 90ml 的無菌稀釋劑(如 pH7.0 氯化鈉-蛋白胨緩沖液)中,可得到 10?1 稀釋度的樣品,以此類推進(jìn)行其他梯度的稀釋。
接種:
細(xì)菌接種:對(duì)于細(xì)菌計(jì)數(shù),取各稀釋度的樣品 1ml,分別接種到無菌的營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基平板上。每個(gè)稀釋級(jí)別接種 2 個(gè)平板,以增加結(jié)果的準(zhǔn)確性。使用涂布棒或其他工具將樣品均勻涂布在培養(yǎng)基表面,注意操作過程要盡量避免污染。
霉菌和酵母菌接種:對(duì)于霉菌及酵母菌計(jì)數(shù),取各稀釋度的樣品 1ml,接種到無菌的玫瑰紅鈉瓊脂培養(yǎng)基平板上。同樣每個(gè)稀釋級(jí)別接種 2 個(gè)平板。
培養(yǎng):
將接種后的細(xì)菌培養(yǎng)基平板倒置于 30-35℃的培養(yǎng)箱中培養(yǎng) 48-72 小時(shí),逐日點(diǎn)計(jì)菌落數(shù),一般以 72 小時(shí)的菌落數(shù)報(bào)告。
將接種后的霉菌和酵母菌培養(yǎng)基平板倒置于 23-28℃的培養(yǎng)箱中培養(yǎng) 5-7 天,逐日點(diǎn)計(jì)菌落數(shù),以最終的菌落數(shù)報(bào)告。
結(jié)果觀察與計(jì)數(shù):在培養(yǎng)結(jié)束后,觀察培養(yǎng)基平板上的菌落生長情況。選擇菌落數(shù)在 30-300cfu(細(xì)菌)或 20-200cfu(霉菌和酵母菌)的平板進(jìn)行計(jì)數(shù),并根據(jù)稀釋倍數(shù)計(jì)算出每毫升純化水中的微生物數(shù)量5。
不過,直接接種法在純化水微生物限度檢測中的應(yīng)用存在一定的局限性,因?yàn)榧兓奈⑸锖客ǔ]^低,直接接種可能無法準(zhǔn)確檢測出其中的微生物,所以薄膜過濾法是更為常用和推薦的方法。